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標(biāo)簽酶消化釋放標(biāo)簽實(shí)驗(yàn)
發(fā)布時(shí)間： 2022-03-24 點(diǎn)擊次數(shù)： 830次材料與儀器
溶液與緩沖液 LoTE
Eppendorf 試管步驟
實(shí)驗(yàn)方案 A
1.向含有 Dynabeads 的每個(gè)試管中加入下列物質(zhì)：
2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。
3.時(shí)收集上清液（含有釋放的 cDNA 標(biāo)簽）
4.用 LoTE 擴(kuò)容到 200mL。
5.等體積的 PCI 抽提，乙醇沉淀（實(shí)驗(yàn)方案 A，第 2 步）。
6.將沖洗和風(fēng)干后的沉淀重新懸浮于 10 ul LoTE 中。
實(shí)驗(yàn)方案 B
1.從 PCR 試管中移去連接反應(yīng)混合物并用 50ul 洗液洗滌 1 次。
2.從試管中移去沖洗液，加入 50 ul 的 1X 限制性緩沖液，然后移去限制性緩沖液。
3.向試管中加入下列物質(zhì)：
4.在 65°C 下消化 lh。
5.加入 175ul 的 LoTE 然后轉(zhuǎn)移到 1.5 ml 的 Eppendorf 試管中。不要丟棄，因?yàn)榛旌衔镏泻兴尫诺母街诮宇^上的 SAGE 標(biāo)簽。
6.如上所述，用等體積的 PCI 抽提，乙醇沉淀（實(shí)驗(yàn)方案 A，第 2 步)。
7.將沖洗和風(fēng)干后的沉淀重新懸浮于 21.5ul 的 LoTE 中。
以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。
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安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶(hù)，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。
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