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補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)
發(fā)布時(shí)間： 2021-11-01 點(diǎn)擊次數(shù)： 822次材料與儀器小鼠
Hank's液 抗小鼠Thy-1的單克隆抗體 補(bǔ)體 伊紅-Y染液
解剖器械 平皿 不銹鋼網(wǎng) 試管 吸量管 尖吸管 載玻片 蓋玻片實(shí)驗(yàn)步驟1. 小鼠胸腺細(xì)胞懸液的制備
將 4～6 周齡小鼠采用頸椎脫臼法處死，取出胸腺放入已加入約4 ml冷Hank's液的平皿中，在100 目的不銹鋼網(wǎng)上研磨后，過(guò)篩，放入試管，離心1000 rpm，5 分鐘，用Hank’s液洗兩次。將沉淀的細(xì)胞重懸于Hank's液中，配成1×107 /ml細(xì)胞懸液。
2. 取試管3 支，標(biāo)明順序，依據(jù)下表依次加入1×107 /ml胸腺細(xì)胞懸液、抗小鼠Thy-1 的單克隆抗體（最適稀釋度）及Hank's液，放入37 ℃水浴30 分鐘。
3. 取出后每管加入1 ％伊紅-Y 染液1 滴，混勻，室溫放置2 分鐘。
4. 重新混勻后分別在一張載玻片上滴片，加蓋玻片鏡檢。先在低倍鏡下觀察，再用高倍鏡觀察，比較3 管中細(xì)胞死活情況。
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